產品描述

革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒定染色法，媒染劑碘液進入菌體后與結晶紫結合，革蘭氏陽性菌對碘與結晶紫攝取量多且牢固，不易被酒精脫色。革蘭氏陰性菌對碘與結晶紫攝取量少，不牢固，易被酒精脫色。為觀察方便，脫色后再用一種紅色染料，如堿性番紅進行復染。陽性菌仍為紫色，陰性菌則被染為紅色。

訂購信息

產品組分

運輸與保存

常溫運輸。常溫避光保存，有效期12個月。

使用方法

1.    準備

(1)  使用無菌接種環(huán)，挑取一薄層樣品置于載玻片上并涂片；

接種環(huán)通過酒精燈火焰灼傷而達到無菌，使用前可以冷卻30s；

如果檢測的組織樣品可能被細菌污染，或者在培養(yǎng)基中有細菌生長，可直接用接種環(huán)挑取樣品并置于載玻片上。如果檢測培養(yǎng)板上生長的細菌克隆，可現(xiàn)在載玻片上滴加一滴無菌水，然后挑取一個克隆，并將其置于水中。

(2)  使涂片自然干燥，熱固定，在酒精燈的火焰上略過2-3次；注：不要將載玻片持續(xù)置于火焰上，以免樣品過熱。

2.    染色

(1)  將熱固定后的載玻片置于裝有草酸銨結晶紫染液的染缸中，使載玻片在染缸中站立1min。

(2)  使用自來水輕輕的洗載玻片5s，抖掉多余的水。

(3)  將載玻片置于裝有革蘭氏碘液的染缸中1min，水洗，并抖掉多余的水。

3.    脫色和復染

(1)  略微傾斜載玻片，將脫色液滴加在載片上端，使其下滑通過樣品區(qū)，直至紫色出現(xiàn)為止。重要的是，脫色既不能過度也不能不足。如果脫色過度，可將革蘭氏陽性菌誤判為陰性菌；如果脫色不足，可將革蘭氏陰性菌誤判為陽性菌。

(2)  水洗5s，抖掉多余的水分。

(3)  使用番紅復染液染色1min。

(4)  水洗5s，抖掉多余的水分。允許其自然干燥，或者用吸水紙小心的將水分吸干。

4.    鏡檢：在油鏡(900×~1000×)下觀察細菌以區(qū)分革蘭氏陽性菌和陰性菌。不要使用蓋玻片，在載玻片中間加一滴油觀察細菌。如果需要，載玻片可保存于載片盒中數月再觀察。

染色結果：革蘭氏陽性菌染為藍紫色，革蘭氏陰性菌染為紅色。

注意事項

1． 本產品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。

2． 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3． 革蘭氏染色的關鍵在于嚴格掌握酒精的脫色程度，如脫色過度，陽性菌可被誤染為陰性菌；而脫色不夠時，陰性菌可被誤染為陽性菌。此外，菌齡也影響染色結果，如陽性菌培養(yǎng)時間過長，或已死亡及部分菌自行溶解，都常呈陰性反應。

4． 標本涂片不能太厚。

5． 玻片通過火焰溫度不能過高。

6． 若涂片較厚，延長脫色時間，直至不再出現(xiàn)紫色為止。

7． 碘液變透明，則不能使用。

8． 水洗時動作用輕柔，沿載玻片對角線方向用洗瓶沖洗，以免把菌體沖掉。

9． 第一次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預實驗。

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本產品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。